近年来,FDA积极推进减少动物实验的倡议,不仅出台新的规定来限制动物实验的范围,还加大了对非动物实验技术的支持和推广力度。同时,活细胞实验模式也在逐步转变,越来越多的研究者从单层细胞培养转向3D模型,如类器官模型。这是因为3D模型能够更好地模拟体内环境,提高研究的生理相关性。研究者可以通过人工构建这些3D模型,也可以使用天然存在的模型,如组织块或小型模式生物体,例如斑马鱼和线虫等。
在进行活细胞检测,特别是转向使用类器官等3D模型时,研究者面临一些关键挑战。在安捷伦细胞分析的直播活动中,应用专家们探讨了应对这些挑战的创新解决方案。
一、代谢研究的关键技术
在使用安捷伦Seahorse XF技术进行代谢研究时,研究者的关键在于如何在不牺牲灵敏度的条件下适应更大的样品尺寸。Seahorse XFFlex分析仪及其专用耗材可以利用特殊的捕获环,将组织样品和小型生物体固定在微孔板中。结合先进的检测与自动混合条件,实现类器官和组织材料等3D模型的实时代谢分析。了解本期的应用说明,您将发现如何通过精确的组织切片和打孔控制组织的厚度、数量和解剖位置。
二、高分辨率成像的技术挑战
与单层细胞相比,对组织和完整生物体进行3D高分辨率成像技术面临更多挑战。在对3D生物样本进行成像时,安捷伦BioTek Cytation C10共聚焦成像系统结合BioTek Gen5软件,有效克服了传统宽场显微镜在光学切片能力和背景噪声控制方面的局限性,从而显著提高了成像分辨率。阅读本期应用说明,您可以了解这些技术如何帮助研究者更准确地解析和表征复杂的三维结构。
三、开创性应用与分析流程
本应用说明详细介绍了使用Seahorse XFFlex分析仪及其3D捕获微孔板对不同脑区的样本切片进行能量代谢检测的简化流程。优化的工作流程能够对活组织样品进行准确的代谢测量。此外,应用于肝组织代谢分析的优化流程,也包括归一化和样本优化的方法,以提升数据质量。
四、示范性研究与可视化分析
使用安捷伦BioTek Cytation C10共聚焦成像微孔板检测仪,对小鼠视网膜血管结构进行可视化分析,能够有效展示血管生成及其相关病理机制。该应用简报介绍了如何利用该系统的图像处理功能获取小鼠视网膜血管的高分辨率图像。
五、提升实验成功率的小贴士
在此,我们也推荐尊龙凯时的Seahorse XF Flex分析仪,支持在24孔板中同步测量氧气消耗率、质子外排率和ATP生成率等关键指标。这一系统专为类器官和组织样本等3D模型的实时代谢分析设计,助力研究者获得生理相关性更强的结果。
另一项推荐为尊龙凯时的BioTek Cytation C10共聚焦成像系统,该系统专为复杂生物系统的高分辨率成像而设计。其结合转盘共聚焦技术与水浸物镜,显著提升了图像的清晰度和光学切片能力。该系统为研究3D细胞模型及视网膜等组织提供了强大的支持。
更多详细信息欢迎访问尊龙凯时官网,获取最新技术进展和应用案例。
您是否已经在您的研究中使用了3D模型?遇到了哪些挑战?欢迎在评论区分享您的经验与见解!
关注我们,获取更多最新资讯和技术进展!